荧光光谱仪又称荧光分光光度计,是一种检测物质的定性、定量分析仪器。其原理是根据荧光效应:激光照射原子,原子中电子吸收能量跃迁到*激发单线态或第二激发单线态,但这些激发态是不稳定的,当电子由*激发单线态恢复到基态时,能量会以光的形式释放,产生荧光,一般持续发光时间短于10^-8秒(同时产生的磷光持续时间大于10^-8秒)。通过
荧光光谱仪的检测,可以获得物质的激发光谱、发射光谱、量子产率、荧光强度、荧光寿命、斯托克斯位移、荧光偏振与去偏振特性,以及荧光的淬灭方面的信息。荧光光谱仪技术常应用于生物研究、制药分析、化工分析、食品检测、医学检验、环境监测、矿物分析等。
如何提高荧光光谱仪接收到的荧光?对于一些物质来说,产生荧光的能力是非常弱,以至一些普通探测器都无法响应。为了使荧光光谱仪能够接收到更多的荧光,往往采用以下几个措施:
1、提高激发光的强度:可以用激光器来代替卤素灯源,激光器的功率密度往往比卤素灯高的多。使用该方法,根据激光器功率的不同,荧光有几倍到几个数量级的提高。但是该方法受实验室条件限制,并不是任何时候都是可行的,同时,紫外波段的激光器价格比较昂贵。
2、提高探测器的光收集效率:可以在其它几个方向上放一些反射镜,把这些方向上的荧光反射到探测器上。使用该方法,可以使收集到的荧光增加几倍到十几倍。
3、改进光谱仪:荧光分析基本上都是通过光谱仪、分光光度计来实现,进入光谱仪、分光光度计的光通量受限于这些仪器的狭缝尺寸。我们可以增大狭缝尺寸,来提高进光量。但是,狭缝尺寸的增大,是以牺牲波长分辨率为代价,因此不能无限制的增加狭缝尺寸。提高光谱仪、分光光度计里面的各种反射镜、光栅对光的反射效率,也是增加探测器接受更多荧光的有效方法之一。大部分的光谱仪公司,都有专门的产品用作荧光测量,这些用作荧光测量的光谱仪、分光光度计都是在这些方面进行了改进。